经（jīng）过我们多年生产（chǎn）实践（jiàn）栽培总结出来的经（jīng）验是选用当年表现优异的羊肚菌子实体（tǐ）进行组织分离以后，再（zài）繁育出来的（de）菌种进行栽培播种（zhǒng），由于转代次数少（shǎo），变异性概（gài）率低。再（zài）进行（háng）播种，基本可以（yǐ）保障稳定的出菇（gū）率。综上所述，掌握（wò）成熟的羊肚菌育种技术是必要的。以下（xià）为大（dà）家详细的介绍（shào）羊（yáng）肚菌菌种分离及提纯复壮技术：
一（yī），选种菇  正常情况在清晨还没有浇水（shuǐ）之（zhī）前采摘6分（fèn）熟的，没有病害感染，虫害咬食的健康羊肚菌作为种菇，还要看（kàn）菇形与其母本的外观形（xíng）态（tài）相（xiàng）似度越高越好。采（cǎi）菇（gū）以后不要带（dài）土（tǔ）装入塑料袋中，根据不同品种写好标签。
二，种菇处理（lǐ）  将采到的种菇（gū）进行测量，称重（chóng），并做好详（xiáng）细记（jì）录，测（cè）试种菇高，菌柄（bǐng）直径，菌帽直径，和菌帽高（gāo）度。

三，准备工（gōng）作  将（jiāng）制备（bèi）好的PDA 培（péi）养基试管，无菌（jun1）水，储水（shuǐ）罐（guàn），酒（jiǔ）精棉（mián），无菌棉（mián）摄（shè）子，酒（jiǔ）精灯，火机，种菇等物（wù）品放到无菌操作（zuò）台上，将杀菌灯开好，无菌（jun1）风机（jī）同（tóng）时打开，20分钟后就可以进行分离（lí）羊肚（dù）菌（jun1）菌种的操作了。也（yě）可以在接种箱中进行，把（bǎ）上述（shù）物品（pǐn）全（quán）部放入接种（zhǒng）箱（xiāng）。接种箱封闭好以后用二（èr）氯（lǜ）异氰悄酸纳（nà）薰蒸30分钟即可开始（shǐ）分离羊肚菌菌种的工作（zuò）了。

四，分离菌种  1，带好手套，伸入无菌操作（zuò）台（tái）的（de）无菌区，或接种箱内，先用酒精棉（mián）球对双手手套外表进（jìn）行彻（chè）底擦拭消毒，然后（hòu）用无菌水对羊肚菌种菇（gū）进行（háng）冲洗冲洗过程的水（shuǐ）倒入储（chǔ）水罐中（zhōng），内外都要冲洗，冲洗时间为（wéi）2-3分钟，冲洗以后用无菌棉吸干羊肚菌表面水分。然后将攝子用（yòng）酒精棉消（xiāo）毒处理（lǐ）以后，放（fàng）在酒精（jīng）灯（dēng）火焰顺（shùn）风方向燃烧消毒，再将（jiāng）羊肚菌菌帽与菌柄处掰断，将菇帽部分放到（dào）一边，只用菌柄部分，再拿起（qǐ）一支试（shì）管（试管和菌柄同时用左手拿好（hǎo），在（zài）酒精灯火焰顺风处取下棉塞，棉塞夹在右手中（zhōng）指（zhǐ）和无名指之间，注意塞入试管部分的（de）棉塞向外，不要与手接触，右手的拇指（zhǐ）和食指拿摄子夹取菌柄与菌帽断（duàn）开（kāi）处的3毫（háo）米见方的一块（kuài）羊（yáng）肚菌组织，接（jiē）入试管斜面培养基前端，塞好（hǎo）棉塞，放（fàng）在旁（páng）边，注意始终保持试管培养基平（píng）面向下，轻拿轻放。然后再进行下一（yī）支（zhī）试管的操作。

五，培（péi）养  将分离好的菌种（zhǒng）贴好标签：标（biāo）签内（nèi）容（róng）包括日期，品（pǐn）种名称等信息。然后就可以放在（zài）20-23度的（de）条件下恒温培养（yǎng）。注意每天观察（chá）长势，杂菌感染（rǎn）严重的及时挑出。感染轻（qīng）微的可以保（bǎo）留进行提纯处理。

六（liù），提纯  在分离（lí）的过程（chéng）中，难免有杂（zá）菌感染，根据羊肚菌菌丝生（shēng）长速度快的特点，即使有羊（yáng）肚菌菌丝（sī）与（yǔ）杂菌共（gòng）同萌发生（shēng）长（zhǎng），经（jīng）过三天培养，羊肚菌菌丝长势（shì）会超过（guò）杂菌一大截，遇到这（zhè）种情况时就可以进行（háng）提纯处理：
1，准备工（gōng）作：准备（bèi）提纯的菌种（zhǒng），空PDA试管培养基，酒精灯，酒精棉，接种（zhǒng）钩（gōu），火机。消（xiāo）毒处理（lǐ）和上述方法一致。
2，提纯流程  戴好手套，用酒精（jīng）棉擦（cā）拭消毒，将接种钩擦（cā）拭消毒（dú），然后在（zài）酒精灯火焰顺风方向（xiàng）取（qǔ）下等待提纯（chún）菌种试管棉塞，用接种钩在（zài）酒精灯火焰（yàn）处灼（zhuó）烧消毒处理以后将原来接（jiē）入的已经感染杂（zá）菌的组织（zhī）块部位（wèi）的培（péi）养基（jī）一同（tóng）钩出试管，没有感染（rǎn）杂（zá）菌长有羊（yáng）肚（dù）菌（jun1）菌丝的培养基保留1-2厘米即（jí）可（kě）。注意接种钩尽（jìn）量不要接触到杂（zá）菌感（gǎn）染（rǎn）的部（bù）分。然后仔细对接种（zhǒng）钩进行彻底（dǐ）消毒（dú）处理以后就可（kě）以取保留的羊肚菌纯（chún）菌丝（sī）接入新的PDA培养基中，大小以3毫米见方（fāng）一块为宜。然后将提纯后的试管贴好（hǎo）标签，做好记（jì）录。再放到20-23度进行恒温（wēn）培养。
七，菌种保藏   分离，提纯好的羊（yáng）肚菌菌种以后需要及时进行菌种保藏处（chù）理，具体请参照菌种保藏方法 在适当的季节进行出菇（gū）栽培实验。